在工作中,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng) 行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果。因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
在ELISA實(shí)驗(yàn)中,完整的大鼠ELISA試劑盒主要包含:
1、酶的底物。
2、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)。
3、酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)。
4、結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液。
5、洗滌液。
6、陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中)。
7、酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的最終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
那么被冷凍后的ELISA試劑盒質(zhì)量會(huì)受損嗎
為其保存后可以使用,但不能反復(fù)凍融,如果您在一周之內(nèi)做實(shí)驗(yàn),可以2-8℃保存;如果您在一周至一個(gè)月之內(nèi)做實(shí)驗(yàn),可以-20℃保存;如果您在一個(gè)月以上做實(shí)驗(yàn),可以-80℃保存。但是值得注意的是,凍融一次比2-8℃保存損失更大,主要是因?yàn)榈鞍椎慕到猓瑑鋈谝淮蔚鞍锥加薪到狻?/p>
在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2小時(shí),產(chǎn)物的天生可達(dá)ding峰。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫4℃等。
室溫溫育時(shí)平置于操縱臺(tái)上即可。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。操縱時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在劃定的范圍內(nèi),尺度室溫溫度是指20~25℃,但詳細(xì)操縱時(shí)可根據(jù)仿單的要求控制溫育.
以上就是大鼠ELISA試劑盒冷凍后的處理方式,大家在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中一定要多加注意。上海通蔚生物宗旨是為了中國(guó)生命科學(xué)事業(yè)的騰飛,我們?nèi)σ愿埃愿玫钠焚|(zhì)、更優(yōu)惠的價(jià)格、更專(zhuān)業(yè)的技術(shù)服務(wù)好每一位客戶(hù)的需求。
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